反相液相色譜法測定食品中的蘇丹紅1號
甘源,趙艦, 肖義夫,王正虹,顧萬江
[摘要] 目的:建立反相液相色譜法測定食品中的蘇丹紅1號的方法。方法:食品中的蘇丹紅1號經(jīng)乙醇提取
后用反相液相色譜一二極管陣列檢測器(DAD)測定。結(jié)果:該方法線性范圍從0.5~1000 fig/m1,標(biāo)準(zhǔn)差為0.18,
相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.73%,平均回收率為95.43%,zui低檢出限為0.2 ng,zui低檢出濃度為0.02 mg/kg。人工合成色素(檸
檬黃、日落黃、胭脂紅、莧菜紅、亮藍(lán)、靛藍(lán)、靛藍(lán))不干擾其測定。結(jié)論:該方法線性范圍廣、精密度高、準(zhǔn)確度好、
選擇性強(qiáng),完滿足食品中蘇丹紅1號的定性定量分析。
[關(guān)鍵詞] 反相液相色譜;食品;蘇丹紅1號
[中圖分類號】R122.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號】1003—8507(2005)12—1760—02
TO Dj朗:嘲’THE SUDAN I IN FOOD USING METHOD OF RE—HI'LC.GAN Yuan,ZHAO Jian,XIAO Yi— ,et a1.
Centrofor Disease Control and Prevention ofChongqing Gty,Chongqing,400042.
Abstaet:Objective:Toevaluatethemethxt of detection of Sudan I infoodsbased OI3.theuseof RE—HPU .Methods:Sudan
1 in foods were detected by re-HPLC—DAD after extracted by alcoho1.Results:This method could detect Sudan I in samples ef—
fectlvdy while its eoneentrat~on va.~ed from 0.5~g/rnl to 1 000 I-tg/m1.The stan dard deviation WaS 0.18.relative standard devia—
tion was 0.73% ,an d average recovery Was 94.43% . 0.2 ng was observed as its detection limit,while the concentration limit Was
0.2mg/Kg.Artificial synthesized pigments hadI10disturbanceintheprocess.Conclusion:Thismethodisvalidatedintdh ofdetection
limitS,linearity,sensitivity,accuracy an d selectivity in detection of Sudan I in foods.
Keywords:Re—HPLC;Foods;Sudan 1
蘇丹紅1號化學(xué)名稱為1一偶氮苯基一G一萘酚,是用于溶解劑、油彩、蠟、地板蠟、機(jī)油、鞋油、香皂等化工產(chǎn)品中的一種非生物合成著色劑,不溶于水易溶于有機(jī)溶劑乙醇、乙腈、氯仿等,分子式:CJ6Hl2 N20,分子量:248。本品具有致癌性,國內(nèi)外有關(guān)規(guī)定均嚴(yán)禁在食品中使用蘇丹紅1號。
1 材料與方法
1.1 原理蘇丹紅1號染ls}經(jīng)乙醇提取后,超濾,濾液經(jīng)液相色譜Cl8柱分離,用二極管陣列(DAD)檢測器在478c丌1處進(jìn)行檢測,以保留時(shí)間定性,以峰高或峰面積定量。
1.2 儀器與試劑
1.2.1 乙腈(色譜純)、水(超純水,其電阻率>18.2Mf1)、冰醋酸(分析純)、無水乙醇(分析純)
1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液精密稱取0.1000 g蘇丹紅1號標(biāo)準(zhǔn)品(分析純),以乙醇溶解并轉(zhuǎn)人100ml容量瓶中,并以乙醇稀釋定容至刻度,即為1 g/L的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。標(biāo)準(zhǔn)系列的配制:用:丕步稀釋法將乙醇稀釋為0、0.5、[作者單位]重慶市疾病預(yù)防控制中心,重慶,400042
[作者簡介]甘源(1972-),女,本科,主管技師,主要從事食品衛(wèi)生檢驗(yàn)工作.
1.0、2.0、4.0、10.0及20.0~g/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列。
1.2.3 儀器液相色譜儀:AgilentlO00型,具DAD檢測器,Agilent ZORBAX Cl8柱(150 C'ft×4.6 rnnl,3/an)、萬分之一天平、超聲波萃取儀
1.3 樣品前處理樣品制備:將采集樣品放入一個(gè)容量較大的密閉容器中混合均勻。對于固體樣品要用打漿機(jī)或粉碎機(jī)磨細(xì)。
1.3.1 甜椒或紅辣椒粉稱取10 g(準(zhǔn)確至0.01 g)樣品于三角瓶中,用量筒加入100 ml乙醇。
1.3.2 粉狀調(diào)味品稱取5 g(準(zhǔn)確至0.01 g)樣品于三角瓶中,用量筒加入100 ml乙醇。
1.3.3 調(diào)味辣椒醬、原味辣椒醬、辣椒油等,稱取20 g(準(zhǔn)確至0.01g)樣品于三角瓶中,用量筒加入100 ml乙醇。
1.3.4 肉及肉制品稱取20 g(準(zhǔn)確至0.01 g)樣品于三角瓶中,用量筒加入100 ml乙醇。
以上樣品經(jīng)超聲提取1 h后過濾于三角瓶中,如果濾液渾濁,則取濾液于12000 r/min離心10 min,濾液根據(jù)待測物含量的高低進(jìn)行濃縮或稀釋,測定前取一部分過0.45岬膜,濾液待測。
1.4 色譜條件流動(dòng)相:0.1% (體積分?jǐn)?shù))乙酸+乙腈=20+80:
現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)2oo5年第32卷第12期Modem Preventive Medicine,2oo5,vl01.32,2
色譜柱:Agilent ZORBAX Cl8柱(150 cn1×4.6咖,3/an),柱溫:常溫;流速:1.0 ml/min,恒流;二極管陣列檢測器,檢測波長:478 nln,峰寬40 nln,參考波長360 nln,峰寬100 nm;
進(jìn)樣量:10 l。
1.5 方法將配制好的標(biāo)準(zhǔn)系列及處理好后的樣品于上述色譜條件下測定,標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見圖1,樣品色譜圖見圖2。
圖1 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖
圖2 樣品色譜圖
2 結(jié)果與討論
2.1 線性范圍的測定
2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)系列1的測定將0、0.50、1.0、2.0、4.0、10.0、20.0 gg/ml的標(biāo)準(zhǔn)系列,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)10 分析,測定結(jié)果見表1。
表1 標(biāo)準(zhǔn)系列1的測定結(jié)果
標(biāo)準(zhǔn)濃度(gg/mL) 0 0.50 1.0 2.0 4.0 10.0 20.0峰面積(roAU*S) 0 1.12 2.85 4.85 9.72 24.57 48.69以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程:y=2.43x+0.076;
a=0.076,b=2.43;7=0.99992.1.2 標(biāo)準(zhǔn)系列2的測定 將0.20.0、50.0、100.0、
200.0、500.0及1000.0~g/ml的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液,每個(gè)進(jìn)10 1分析,測定結(jié)果見表2。
表2 標(biāo)準(zhǔn)系列2的測定結(jié)果
面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
回歸方程:y=2.53x一10.17;
a=10.17,b=2.53;7=0.9999
由上述結(jié)果可知,在0.5 ~1000~g/ml范圍內(nèi)線性良好。
2.2 精密度試驗(yàn)分別取1、10和40 pg/mL標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液每個(gè)濃度重復(fù)測定9次,其標(biāo)準(zhǔn)差分別為:0.040、0.18和0.30;相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(變異系數(shù))為:1.41%、0.73%和0.31%;測定結(jié)果見表3。
表3 3個(gè)濃度精密度試驗(yàn)結(jié)果(gg/m1)
2.3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)于樣品中分別加入2.0,10及40 vg/ml蘇丹紅1號標(biāo)準(zhǔn),作加標(biāo)回收試驗(yàn),測定結(jié)果見表4。
表4 準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果(~g/m1)
2.4 zui低檢出限的測定 實(shí)驗(yàn)測得其zui低檢出限0.2 ng,如果樣品取10 g,提取后zui后定容至10 rnl,進(jìn)10 分析,則zui低檢出濃度為0.02mg/kg。
2.5 提取溶劑的選擇本方法選擇了無水乙醇、乙腈作為萃取劑,經(jīng)檢測無水乙醇與乙腈的提取效果相同,本著經(jīng)濟(jì)、安全的原則,zui終確定選無水乙醇作的樣品的提取溶劑。
兩種溶劑的提取效果試驗(yàn):分別選取3種不同性狀的樣品,均加入10~g/rnl的蘇丹紅1號標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別用無水乙醇和乙腈提取,兩種溶劑提取效果無差異,見表5。
表5 兩種提取溶劑各樣品的蜂面積(mAu*S)
2.6 干擾試驗(yàn)將樣品中分別加入人工合成色素檸檬黃、日落黃、胭脂紅、莧菜紅、亮藍(lán)、靛藍(lán)等,均不干擾蘇丹紅1號測定,見圖3。
圖3 混合色素色譜圖
聯(lián)系我們
天津市金貝爾科技有限公司 公司地址:天津市高新區(qū)華苑產(chǎn)業(yè)園區(qū)海泰創(chuàng)新六路華鼎新區(qū)一號3號樓10層 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網(wǎng)站二維碼